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淺談離心機(jī)

點(diǎn)擊次數(shù):4579 更新時(shí)間:2014-08-12
       離心機(jī)的工作原理是:在*的離心力作用下,使旋轉(zhuǎn)中的樣品逐漸偏離旋轉(zhuǎn)中心,從而達(dá)到沉降分離的效果。雖然離心機(jī)的原理很簡單,但是其適用于大量不同的工業(yè)應(yīng)用和研究實(shí)驗(yàn),離心相關(guān)的技術(shù)文獻(xiàn)非常之多。
      作者:Angelo DePalma,博士| 2014年3月12日



實(shí)驗(yàn)室常規(guī)離心機(jī)
      臺式離心機(jī)/貝克曼庫爾特Allegra X-5/

      高速離心機(jī)/賽默飛世爾科技Sorvall LYNX/

      細(xì)胞培養(yǎng)離心機(jī)套裝/海蒂詩/

      值得注意的是,離心的分離效率與旋轉(zhuǎn)半徑成正比,而與轉(zhuǎn)速(指每秒或每分鐘的旋轉(zhuǎn)速度,通常用每分鐘旋轉(zhuǎn)周數(shù)rpm表示)的平方成正比。

      因此,在轉(zhuǎn)速固定不變的情況下,半徑為12英寸的離心機(jī)的效率是半徑為6英寸的2倍。而在半徑相同的情況下,轉(zhuǎn)速為1,000rpm時(shí)的離心效率是500rpm時(shí) 的4倍。

      離心機(jī)一般按尺寸、速度和應(yīng)用來分類。相同大小的離心機(jī)還可以進(jìn)一步按轉(zhuǎn)頭容量、離心管尺寸和樣品數(shù)量等細(xì)分。離心速度(或相對離心力)是指施加到樣品上的離心力,其大小選擇與所需分離樣品的性質(zhì)有關(guān)。zui的超速離心機(jī)可以分離各種分子、細(xì)胞組分,甚至同位素。隨著轉(zhuǎn)速的提高,一些平時(shí)難以區(qū)分的樣品也可以得到更精細(xì)的分離。

      按轉(zhuǎn)速來給離心機(jī)分類是zui常見的分類方式,盡管按相對離心力(RCF,單位g)來分類更準(zhǔn)確。萊伯特(康寧生命科學(xué)公司子公司,位于新澤西州愛迪生鎮(zhèn))的產(chǎn)品Peter Will稱,轉(zhuǎn)速(RPM)是客戶zui經(jīng)常詢問的參數(shù), “但是相對離心力實(shí)際上才是更為關(guān)鍵的數(shù)字”。

      一個(gè)應(yīng)用所需的轉(zhuǎn)速快慢并不代表其是否“先進(jìn)”。科研工作者通常使用相對較低的離心力(約300xg)來分離比較敏感的干細(xì)胞,而同時(shí)用高達(dá)1,000,000xg的離心力來分離DNA、RNA、病毒顆粒和蛋白質(zhì)。

      市場上有各種各樣的轉(zhuǎn)頭類型可供實(shí)驗(yàn)室選擇,兩種zui常見的類型是定角轉(zhuǎn)頭和甩平式水平轉(zhuǎn)頭。定角轉(zhuǎn)頭中的樣品管以一定的角度固定在轉(zhuǎn)頭內(nèi),離心過程中樣品會沿著離心管的側(cè)壁逐漸沉淀到底部。

      在甩平轉(zhuǎn)頭中,當(dāng)離心達(dá)到一定速度時(shí),樣品管會從一個(gè)垂直狀態(tài)擺動到與地面或工作臺水平的位置,沉淀將平整地聚集在離心管的底部。

      這兩種類型的離心轉(zhuǎn)頭均可使用多種樣品容器,包括微量管(1-2毫升),錐底管(50-500毫升)等,還包括用于分離血液、血漿等工業(yè)流程的更大型的容器,甚至還包括微孔板。美國安捷倫公司(位于加利福尼亞州圣克拉拉市)的微孔板離心機(jī)可以跟微孔板抓手及其他模塊組合,實(shí)現(xiàn)各種復(fù)雜實(shí)驗(yàn)流程的自動化操作。

      供應(yīng)商們一直致力于研發(fā)有針對性設(shè)計(jì)的離心機(jī)來滿足各種各樣的離心實(shí)驗(yàn)和不同容器的適配需要。因此,各種容量和型號的離心機(jī)層出不窮。賽默飛世爾科技公司(位于馬薩諸塞州沃爾瑟姆市)的商務(wù)總監(jiān)Hugh Tansey說:“市場上針對不同應(yīng)用的離心機(jī)選擇范圍十分廣泛”。

保養(yǎng)與維護(hù)

      很多人都聽說過一些重大的離心機(jī)事故,嚴(yán)重的會使離心機(jī)自身和周圍設(shè)備*報(bào)廢。很不幸這些故事都是真實(shí)的,所以新型的離心機(jī)設(shè)計(jì)會通過自動轉(zhuǎn)頭識別和動態(tài)慣量檢查來顯著減少這些潛在的安全風(fēng)險(xiǎn)。一旦發(fā)現(xiàn)樣品有不平衡現(xiàn)象,離心機(jī)會立即自動停機(jī)。Peter Will說道:“一臺好的離心機(jī)可以迅速檢測出樣品的不平衡情況,迅速停機(jī),并同時(shí)發(fā)出聲音或者圖像警報(bào)。”

離心機(jī)和血糖儀用的清潔用紙/ HYPE-WIPE®和MINI HYPE-WIPE®/ 

      與這些災(zāi)難性事故相比,更為普遍的是各種離心機(jī)運(yùn)行錯(cuò)誤或者故障,這些直接導(dǎo)致了機(jī)器無法使用,或者更糟糕的——樣本損失。Tansey說道:“實(shí)驗(yàn)人員需要經(jīng)過漫長的處理流程才使樣本進(jìn)行到離心收集的步驟,他們絕不希望這些樣品被鎖在離心機(jī)中,導(dǎo)致?lián)p壞或者丟失。”

      轉(zhuǎn)頭的加速和減速速度需要在更長的樣品平衡時(shí)間和更快的運(yùn)行速度之間進(jìn)行平衡。轉(zhuǎn)頭減速過快可能會擾亂樣品的沉淀,而減速過慢則會明顯延長運(yùn)行時(shí)間。“比較理想的狀態(tài)是快速啟動配上軟制動,”Will說,“高品質(zhì)的離心機(jī)可以通過電子技術(shù)和程序控制實(shí)現(xiàn)這樣的功能,允許用戶自由設(shè)定加速度和減速度,這已逐漸成為離心機(jī)行業(yè)的標(biāo)準(zhǔn)配置。”

      還有一點(diǎn)值得一提,離心機(jī)應(yīng)當(dāng)在安全性上保護(hù)操作人員免受有害物質(zhì)侵害,這包括有毒化學(xué)物質(zhì)、致病菌和病毒等。Will說:“如果用戶需要處理這類樣品,應(yīng)當(dāng)選擇使用帶有氣密性蓋子的轉(zhuǎn)頭和機(jī)型。”

清潔
      離心機(jī)一般相對不容易被污染。但是各廠家仍然會建議進(jìn)行定期的常規(guī)清潔,他們一般會推薦自己的清潔劑和專業(yè)清潔產(chǎn)品。

      貝克曼庫爾特生命科學(xué)公司(位于美國印第安納州印第安納波利斯市)的營銷Randall Lockner建議說,至少每運(yùn)行幾次就要擦拭一次離心機(jī)的“機(jī)箱”(腔體)。這不僅可以保持潔凈的外觀,還可以防止更嚴(yán)重的腐蝕或者交叉污染。“檢查所有蓋子和轉(zhuǎn)頭密封圈是否磨損、開裂或有雜質(zhì)堆積,這應(yīng)該成為儀器日常維護(hù)流程的一部分。”

許多生命科學(xué)研究流程仍然使用放射性物質(zhì)
      如果用戶沒有按照不同同位素的性質(zhì)正確地檢查或清洗離心機(jī)主機(jī)和轉(zhuǎn)頭,那么離心機(jī)可能會變得相當(dāng)“熱”。此外,還可能出現(xiàn)嚴(yán)重的交叉污染,從而影響到后續(xù)的同位素成像、放射性掃描或者液閃計(jì)數(shù)的結(jié)果。按照操作規(guī)范,每次使用同位素后,用戶應(yīng)當(dāng)分別使用沾有可溶解吸收無機(jī)和有機(jī)材料的棉簽進(jìn)行擦拭,然后計(jì)數(shù)檢測。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)采取適當(dāng)措施防止高濃度的同位素泄漏和處理具有潛在危險(xiǎn)的棉簽,以保護(hù)操作人員。

轉(zhuǎn)頭是日常維護(hù)中zui重要的部分
      艾本德公司(位于紐約州哈帕市)的產(chǎn)品Matt Lieber說:“生命科學(xué)研究經(jīng)常使用鹽緩沖液,在樣品取出后,這些緩沖液仍然會以氣溶膠或其他形式殘留在轉(zhuǎn)頭中。”與傳統(tǒng)金屬轉(zhuǎn)頭相比,電鍍鋁合金轉(zhuǎn)頭和碳纖維轉(zhuǎn)頭受鹽離子侵蝕的程度相對較少,但是仍然需要定期的清洗。Lieber建議使用吸水紙巾沾取非離子型清潔劑或70%乙醇溶液進(jìn)行擦拭。

      用戶應(yīng)定期檢查甩平式水平轉(zhuǎn)頭轉(zhuǎn)軸的潤滑情況,并定期涂抹硅潤滑脂。潤滑不當(dāng)一般不會直接引起災(zāi)難性的事故,但是可能會影響到甩平的速度和傾斜角度,譬如會影響到多相分離實(shí)驗(yàn)的結(jié)果(如酚氯仿抽提)。

終端用戶維護(hù)
      無論轉(zhuǎn)頭是由哪種材質(zhì)構(gòu)成,都需要進(jìn)行磨損檢查,各種磨損有可能會使轉(zhuǎn)頭性能下降,甚至成為潛在的安全隱患。檢查內(nèi)容應(yīng)當(dāng)包括各種磨損、劃傷、擦傷,或化學(xué)品接觸腐蝕等。

      定期維護(hù)檢查項(xiàng)目應(yīng)當(dāng)包括所有轉(zhuǎn)頭的檢測,以確保它們處于可運(yùn)行狀態(tài)。貝克曼庫爾特的維護(hù)保養(yǎng)工程師會在執(zhí)行這些檢查后填寫一份關(guān)于轉(zhuǎn)頭狀態(tài)的“報(bào)告卡”。實(shí)驗(yàn)室管理人員應(yīng)密切關(guān)注轉(zhuǎn)頭的使用狀態(tài),在轉(zhuǎn)頭使用年限即將到期前為zui終的更換做好準(zhǔn)備和預(yù)算。

      離心管/ ExtraGene/

      海蒂詩儀器公司(馬薩諸塞州貝弗利市)的東北美地區(qū)Jeff Antonucci建議說:“延長離心機(jī)使用壽命zui簡單的方法就是保持潤滑。此外,用戶應(yīng)當(dāng)定期檢查外殼的氣密性,因?yàn)槊芊猸h(huán)的任何撕裂或破損都可能引發(fā)一系列的問題。特別是冷凍型離心機(jī),氣密性的受損有可能導(dǎo)致腔體內(nèi)產(chǎn)生冷凝水和結(jié)冰。”

      Antonucci還建議用戶“去聽和感受”離心機(jī),“如果您發(fā)現(xiàn)任何不尋常的震動、搖晃、嘯叫,或任何其他不對勁的情況,應(yīng)當(dāng)立即關(guān)閉離心機(jī)并進(jìn)行檢查。如果您無法找出原因,請致電制造商。”

      離心過程中可能會使用到各種有害物質(zhì),如有毒化學(xué)品、生物危險(xiǎn)品和放射性同位素等。無論如何小心操作,泄漏、污染和交叉污染的事件仍時(shí)有發(fā)生。供應(yīng)商們建議用戶無腐蝕性的清洗方式和產(chǎn)品。切記,能夠有效消除致病病毒的清潔產(chǎn)品未必能夠消除放射性污染。

售后服務(wù)
      盡管廠家已盡力使現(xiàn)在的離心機(jī)遠(yuǎn)離災(zāi)難性事故的黑暗歷史,但用戶必須明白,各種不規(guī)范操作或者維護(hù)不當(dāng)仍然會導(dǎo)致各種不良后果或者樣品損失。 “所有使用離心機(jī)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)確保儀器由專業(yè)培訓(xùn)的售后工程師進(jìn)行定期檢測,每年至少一次。”Randall Lockner建議說,“或者至少需要簽訂售后服務(wù)協(xié)議。離心機(jī)是一個(gè)重要的基礎(chǔ)儀器,如果它停機(jī)了,你的實(shí)驗(yàn)室也就無法繼續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn)了。”

      所有的售后服務(wù)協(xié)議都應(yīng)當(dāng)包括不同級別的由經(jīng)過培訓(xùn)的技術(shù)人員進(jìn)行的預(yù)防性維護(hù)措施。貝克曼庫爾特提供不同等級的售后服務(wù)協(xié)議包,可以額外覆蓋機(jī)器硬件的維修或更換。如果沒有售后服務(wù)協(xié)議,則會增加維修的成本,尤其是零部件費(fèi)用,同時(shí)差旅費(fèi)和勞務(wù)費(fèi)也都額外需要計(jì)算。


離心機(jī)轉(zhuǎn)頭/ FA-45-6-30 & A-2-DWP-AT Eppendorf/

      售后工程師,無論是來自供應(yīng)商的雇員,第三方售后服務(wù)機(jī)構(gòu),還是獨(dú)立個(gè)人,都是非例行性離心機(jī)保養(yǎng)和維護(hù)的。*供應(yīng)商會在購買時(shí)安排專業(yè)技術(shù)人員,確保儀器的安裝和水平平衡調(diào)節(jié)正確,并對需要的用戶進(jìn)行培訓(xùn)。Lockner指出:“工程師會檢查電源和通風(fēng)條件是否合適,并確保用戶掌握樣本平衡、轉(zhuǎn)頭更換和其他操作的相關(guān)知識。”

購買決策——考慮因素
      離心分離是一項(xiàng)成熟的技術(shù),但由于其在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室中的基礎(chǔ)性作用,管理者進(jìn)行采購時(shí)需慎重考慮。賽默飛世爾的Hugh Tansey說:“客戶都希望找到一臺高質(zhì)量、品牌度好的離心機(jī)”。用戶普遍希望更快取得結(jié)果,所以轉(zhuǎn)速和轉(zhuǎn)頭容量都應(yīng)被優(yōu)先考慮。

      在選擇離心機(jī)的類型和型號時(shí),應(yīng)當(dāng)考慮其使用范圍,Randall Lockner如是說。“您要分離納米材料嗎?您基本上用于樣品沉淀嗎?用于細(xì)胞培養(yǎng)或細(xì)胞分離嗎?還要考慮的是,在分離樣品過程中需要加入什么物質(zhì),哪部分需要保留,哪部分可以丟棄。”

      就這些考慮因素與供應(yīng)商溝通交流是非常有意義的,因?yàn)椴煌吞柕碾x心機(jī)在功能上經(jīng)常有重疊。“這對新用戶或者*次購買者來說是非常有難度的,”Lockner說,“這取決于供應(yīng)商能否針對客戶的需求解釋清除這些機(jī)型的區(qū)別。對于許多實(shí)驗(yàn)室來說,一臺通用型臺式離心機(jī)以及合適的配件組合就可以完成大部分常見的實(shí)驗(yàn)流程。”

      供應(yīng)商會通過增加產(chǎn)品的靈活性,達(dá)到一機(jī)多用的效果。據(jù)Tansey介紹,與其購買多臺離心機(jī)或通用型落地離心機(jī),不如購買一臺操作簡易、功能強(qiáng)大、體積更小的臺式離心機(jī)。這些離心機(jī)具有直觀的動態(tài)顯示屏,以及電動的自動蓋子鎖定功能。Tansey還說道:“我們的產(chǎn)品歷經(jīng)多次更新?lián)Q代,現(xiàn)在呈現(xiàn)的是面向未來的臺式離心機(jī),提供了更好的安全性、轉(zhuǎn)頭選擇和易用性。”

      如果實(shí)驗(yàn)室需要離心的樣品多達(dá)3L、4L或者更大體積,又或者每次需要離心更多樣品數(shù)量,則需要選擇落地式離心機(jī)。臺式和落地式離心機(jī)都可以進(jìn)行納米顆粒和細(xì)胞組分的沉淀分離,主要區(qū)別是樣品通量和容積。事實(shí)上,許多實(shí)驗(yàn)室都同時(shí)配有這兩種離心機(jī)。Lockner說:“但是,實(shí)驗(yàn)室場地緊張,這會對選購儀器的數(shù)量和尺寸提出限制。”

      管理人員在選購離心機(jī)時(shí)不應(yīng)忽略其對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的影響。大型離心機(jī)占地多,噪音大。許多單位已經(jīng)開始將離心機(jī)集中放置在與實(shí)驗(yàn)人員日常工作區(qū)域有一定距離(甚至是數(shù)層樓)間隔的中心平臺。幸運(yùn)的是,現(xiàn)在的離心機(jī)軟件可以提供具有可追溯性和安全性設(shè)置的多用戶環(huán)境?,F(xiàn)在,一些廠家還允許用戶使用移動應(yīng)用程序遠(yuǎn)程監(jiān)控離心機(jī)的運(yùn)行狀態(tài),例如可以知道程序運(yùn)行是否已經(jīng)結(jié)束,或者前一個(gè)使用者有沒有因?yàn)闆]有準(zhǔn)備好等原因放棄使用機(jī)器。

      許多實(shí)驗(yàn)室仍然使用容量、性能和操作友好性都不如新式離心機(jī)的舊款型號。Tansey說,他們往往把重點(diǎn)放在現(xiàn)有的應(yīng)用上,而沒有考慮到項(xiàng)目和工作流程的改善。新機(jī)型會引入新的轉(zhuǎn)頭或適配器,可以為實(shí)驗(yàn)室提供更好的靈活性和性能。Tansey建議道:“不要過于沉浸在自認(rèn)為經(jīng)典的離心機(jī)型號中。”

      購買時(shí)還要注意耗材的選擇。Lieber說:“有些客戶從來沒有關(guān)注過他們使用的離心管材”。雖然大多數(shù)微型離心轉(zhuǎn)頭和適配器可以兼容大部分的管材,但是冷凍管和HPLC管則需要特殊的適配器。“大型轉(zhuǎn)頭的離心管選擇需要更加小心,因?yàn)榇篌w積離心管的規(guī)格型號非常之多”。

      Lieber還建議客戶慎重考慮機(jī)器的噪音、體積和外形等因素。如果客戶的“辦公室”面積狹小,或者離心機(jī)就放在附近,那么就可能要忍受離心機(jī)頻繁工作時(shí)帶來的噪音困擾。“你必須清楚離心機(jī)準(zhǔn)備放在哪里,是否有合適的工作臺或者地面擺放。”

離心管和轉(zhuǎn)頭
      萊伯特公司的Peter Will會首先詢問客戶如下幾個(gè)問題來鎖定客戶的需求:他們需要使用多大的離心管?需要定角轉(zhuǎn)頭還是水平轉(zhuǎn)頭?每次運(yùn)行需要幾支離心管?是否需要制冷?以及zui后一個(gè)問題,他們的實(shí)驗(yàn)需要多大的相對離心力或者轉(zhuǎn)速?

      離心管/Tube®5.0 mL/艾本德/

      Will說:“每次運(yùn)行幾支離心管這一點(diǎn)至關(guān)重要,并且我認(rèn)為這是我們的一項(xiàng)競爭優(yōu)勢。”通常來說,轉(zhuǎn)頭大小相同時(shí),可使用的離心管越多越好,特別是在一些大型的高通量實(shí)驗(yàn)室。同樣的,轉(zhuǎn)速相同時(shí),大容量的轉(zhuǎn)頭中可以使用小容量的離心管,但是小容量轉(zhuǎn)頭的使用就受限制了。

      Will和本文采訪的其他專家一樣,認(rèn)為能夠輕松取出轉(zhuǎn)頭是離心機(jī)的關(guān)鍵性能。如果需要超過30秒鐘的更換時(shí)間,購買時(shí)則需謹(jǐn)慎。取出困難或更換時(shí)間過長通常意味著人體工學(xué)設(shè)計(jì)不合理或者結(jié)構(gòu)材料過重,這樣有時(shí)候會導(dǎo)致操作失誤。很多《實(shí)驗(yàn)室管理者》的讀者都熟悉的一些儀器(如HPLC,MS)雖然操作復(fù)雜,但是他們的控制面板非常直觀易用,這一點(diǎn)也同樣適用于離心機(jī)。比如萊伯特和赫姆勒品牌的儀器都配有簡單的控制面板,實(shí)驗(yàn)人員在使用不同機(jī)器前無需交叉培訓(xùn)。

      “購買者不應(yīng)該只局限于目前的工藝流程,”Will建議道,“他們應(yīng)該選擇更加靈活的機(jī)型,能夠兼顧當(dāng)前和未來的潛在應(yīng)用方向。”離心機(jī)的靈活性涉及機(jī)器轉(zhuǎn)速,以及各種轉(zhuǎn)頭適配大容量或者特殊離心管、甚至微孔板的能力等方面。

      購買者還應(yīng)該考慮機(jī)器的易用性。Tansey說:“客戶不希望考慮太多因素,他們只是希望離心機(jī)運(yùn)行正常,特別是人員流動性高的和多用戶共用的實(shí)驗(yàn)室。”

      過去,對許多實(shí)驗(yàn)室工作人員來說,更換轉(zhuǎn)頭,特別是大型轉(zhuǎn)頭,簡直就是一項(xiàng)挑戰(zhàn),特別是落地式離心機(jī)中的大型金屬轉(zhuǎn)頭。Tansey說:“以前,這需要借用特殊工具,而且還是個(gè)力氣活。”操作員更換轉(zhuǎn)頭時(shí)操作失誤還是造成設(shè)備損壞的重要原因,特別是未經(jīng)培訓(xùn)的操作員。

      帶螺旋蓋的黑色離心管/Asynt/

      *供應(yīng)商通過減輕轉(zhuǎn)頭重量和簡化轉(zhuǎn)頭拆裝操作來解決令人頭疼的轉(zhuǎn)頭更換問題。因此,新購買大型離心機(jī)時(shí)可以考慮碳纖維轉(zhuǎn)頭,它比同等的金屬轉(zhuǎn)頭輕60%。多種容易腐蝕金屬的化學(xué)物質(zhì)都無法損害碳纖維轉(zhuǎn)頭,因此碳纖維轉(zhuǎn)頭的使用壽命可以更長。賽默飛世爾公司的自動鎖定系統(tǒng)允許通過按鈕式操作更換轉(zhuǎn)頭,無需使用工具。

      另外還值得考慮的是生物安全蓋,特別是對吊桶式水平轉(zhuǎn)頭,它可以保護(hù)用戶不會接觸到離心樣品產(chǎn)生的氣溶膠。生物安全性已成為離心分離生物危害性細(xì)胞和微生物的專有名詞,但實(shí)際上生物安全蓋還能為實(shí)驗(yàn)室使用揮發(fā)性有害物質(zhì)時(shí)提供保護(hù)。

      跟轉(zhuǎn)頭更換一樣,生物安全蓋的安裝也需要一定的技巧和特別的細(xì)心。據(jù)賽默飛世爾公司稱,該公司的ClickSeal技術(shù)可以使安全蓋的拆裝變得更加容易。




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貝克曼庫爾特生命科學(xué)事業(yè)部一直致力于改善*人類的健康。處于地位的貝克曼庫爾特公司,為廣大科研、商業(yè)實(shí)驗(yàn)室的生命科學(xué)研究工作者們提供先進(jìn)的儀器系統(tǒng)、試劑和*的技術(shù)服務(wù)與支持,不斷促進(jìn)生物學(xué)科研的新技術(shù)發(fā)展。作為離心機(jī)和流式細(xì)胞儀的行業(yè),貝克曼庫爾特公司長期以來一直是毛細(xì)管電泳、顆粒表征和實(shí)驗(yàn)室自動化的創(chuàng)新者,其產(chǎn)品主要用于zui前沿的重要研究領(lǐng)域,包括基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)等。欲了解更多信息,敬請?jiān)L問貝克曼庫爾特
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